作为一种复杂的多透镜光学系统,物镜不仅是显微镜的关键部件,还经常用于搭建激光聚焦或光子收集装置。选择物镜时需要考虑规格和应用。规格很容易通过镜筒上刻的符号和文字确定,但要为每个具体的应用找到合适的物镜并不容易。
一、从有限共轭到无穷远校正
有限共轭物镜通常由两个或三个透镜(包含一个消色差透镜)组成。物体处于物镜前方但不在焦平面上,只需把眼睛或相机放在物镜后方就能观测图像。
有限共轭物镜的成像
无穷远校正物镜把物体放在焦平面上,所以输出准直光束(图像位于无穷远),需要另外通过套筒透镜把图像聚焦在中间像平面。这种物镜刻有一个∞符号,内部包含更多的光学元件,所以尺寸和重量通常都大于有限共轭物镜,当然性能也更好。
无穷远校正物镜的成像
无穷远校正设计的好处是可以将其它光学元件尽量向后推,方便操控光束,而且如果不同物镜具有相同的齐焦距离(从物镜肩部到样品或盖玻片顶部的距离),可直接通过一个支架安装并切换物镜,不需要调节套筒透镜。
切换不同放大率的无穷远校正物镜
物镜两端分别要注意的是工作距离(WD)和螺纹孔径。有些物镜提供很小的工作距离(比如高倍率和高NA物镜),所以包含缩进机制,以防碰撞样品时导致损坏。螺纹孔径限制物镜的入瞳直径,而后者应等于物镜数值孔径(NA)和有效聚焦(f)乘积的两倍。
物镜常用的安装螺纹包括RMS (0.800"-36)以及M25 x 0.75或M27 x 0.75螺纹,而更大的M32或M40螺纹能提供更长的工作距离和更大的视野。
油浸物镜和干物镜的标识示例
二、分辨率和放大率
数值孔径(NA)和放大率(M)是物镜的两个主要规格。
NA表示物镜从样品收集光的角度范围并决定分辨率,其大小通常根据阿贝判据以0.5λ/NA计算。NA越大,分辨率越高。在上图中,40x/1.30 OIL表示1.30 NA的40倍油浸物镜,60x/0.85表示0.85 NA的60倍干物镜,所以前者的分辨率更高。
干物镜是指物镜前端和样品之间为空气,可实现的最大NA通常为0.95。为了提高NA,可在物镜和样品之间加入液体,以此增大收集样品光的角度。浸液物镜可通过不同颜色的环辨别,但如果将其当干物镜使用,图像质量会很差。
介质 | 折射率 | 放大率 | NA | 颜色 |
空气 | 1 | 1-100x | 0.04-0.9 | - |
水 | 1.33 | 10-100x | 0.3-1.27 | 白 |
硅油 | 1.4 | 25-100x | 1.05-1.35 | 红 |
甘油 | 1.47 | 10-93x | 0.5-1.3 | 橙 |
油 | 1.515 | 20-100x | 0.4-1.49 | 黑 |
Water Dipping vs Water Immersion
对于放大率,镜筒上也有不同颜色的环:
颜色代码 | 放大率 |
红色 | 4X, 5X |
黄色 | 10X |
绿色 | 16X, 20X |
蓝绿 | 25X |
淡蓝 | 40X, 50X |
钴蓝 | 60X |
白色 | 100X |
Effective M=Design M x fTube lens in microscope/fDesign tube lens
物镜生产商 | 设计套筒焦距(mm) |
Thorlabs, Nikon, Leica, Mitutoyo |
200 |
Olympus | 180 |
Zeiss | 165 |
三、像差校正
物镜按色差校正水平可分为:消色差、半复消色差、复消色差、超复消色差以及改进的可见光复消色差;前三种像差校正等级来自ISO 19012-2标准中的定义。另外,像差校正字符中包含Plan说明校正了场曲。
物镜等级 | 常用缩写 |
消色差 | ACH, ACHRO |
半复消色差或萤石 | SEMIAPO, FL, FLU |
复消色差 | APO |
超复消色差 | SAPO |
改进的可见光复消色差 | VIS+ |
《显微物镜——像场平面度/平场度(ISO 19012-1:2013)》
《显微物镜——色差校正(ISO 19012-2:2013)》
四、场数(Field Number)
以∞/0.17/FN26.5标识为例,前两项说明这是一个无穷远校正物镜,而且需要配合0.17 mm厚的盖玻片使用;如果盖玻片厚度处于某个范围,则镜筒上还会有一个校正环。
第三项FN26.5为场数,以毫米为单位。FN和物镜的有效放大率之比等于物镜可成像的样品直径,比如对于下面三种物镜,由于不同的FN和倍率,可成像的样品直径分别为:
FN26.5 / 40X = 0.663 mm
FN22 / 10X = 2.2 mm
FN26.5 / 100X = 0.265 mm
这说明低倍率物镜有时能观测更大的样品面积,可能更适合特定的应用。另外,视场(Field Of View, FOV)表示探测器实际可观测的样品面积。很多相机传感器和光学元件会限制可观测的样品面积,因为它们的尺寸通常小于物镜场数。