要求显微镜能分辨的最小间隔为0.5μm,如果用波长555nm的光成像,问显微镜物镜的数值孔径应至少为多大?
根据题意要求,最小分辨间隔σ=0.5μm,波长λ=0.555μm,将两个值代入显微镜物镜的分辨率公式得
NA=0.61λ/σ=0.61x0.555/0.5≈0.677
由此可见,当分辨率较高时,显微镜物镜的数值孔径将加大,而数值孔径大时,焦深很小,要求物平面位置的放置精度很高,给装调、使用带来很多麻烦。
如果用波长较短的光进行成像,达到同样的分辨率要求时,数值孔径将减小,焦深也可以加大。