数值孔径和分辨率

数值孔径和分辨率

一、介绍

数值孔径：物镜与样品之间介质的折射率（n）和孔径角（2α）半数的正弦的乘积，衡量该系统能够收集的光的角度范围

N.A. = n sinμ   (n= 折射率)

二、沉浸式媒体

三、艾里斑和显微镜分辨率

瑞利判据：当一个艾里斑的中心与另一个艾里斑的第一级暗环重合时，刚好能分辨出是两个像。

其实分辨率的极限就是，能够分辨两个艾里斑之间的最小距离

显微镜光学分辨率遵循瑞利判据，即当一个艾里斑的中心与另一个艾里斑的第一级暗环重合时，刚好能分辨出是两个像。

用公式计算，就是用艾里斑尺寸的计算公式乘以系数1.22。

只要知道物镜的数值孔径，就可以计算出相应的分辨率，物镜的数值孔径越高，分辨率越好，光学显微镜系统的分辨率极限，通常在220nm左右。

显微成像是样品上的光信号通过物镜放大后成像的过程。一个理想点经光学系统成像，由于物镜尺寸是有限的，信号在通过物镜边界时会发生衍射。发生衍射后所成的光斑，比实际的样品大。对于这样的光斑我们称之为艾里斑。

光的衍射极限通常XY方向在200-300nm，Z方向在500-800nm，显微镜物镜所成的像，为中间一个亮点，和一系列环绕它的亮度渐弱的衍射环组成，称为艾里斑。

艾里斑的大小可以通过公式计算，它受到入射光波长和物镜数值孔径的影响。

0

四、提高分辨率的实用建议

作者QQ及微信：49922779